Revisión de herramientas rápidas de detección de drogas.
En Rusia, se utilizan ampliamente conjuntos de reactivos y materiales químicos, y recientemente ha habido una tendencia a utilizar reactivos y dispositivos inmunoquímicos que funcionan según estos principios.
La identificación e incautación de estupefacientes y sustancias psicotrópicas procedentes del tráfico ilícito requiere el uso de medios técnicos especiales que garanticen la objetividad, justificación e integridad de la implementación de las medidas preventivas y la influencia aplicada por los organismos encargados de hacer cumplir la ley sobre las personas. a quién se le incautan estas muestras de droga.
Estas herramientas deben satisfacer una serie de requisitos, entre los que destacan su selectividad, rapidez, ausencia de resultados falsos negativos y rentabilidad.
Logros y problemas no resueltos, así como posibles errores en la selección Esta publicación está dedicada al método de investigación.
Al realizar actividades de detección e incautación de drogas provenientes del tráfico ilícito, juega un papel importante su rápida identificación en la muestra de objetos en estudio. papel importante.
Debido a las características específicas de los medicamentos, es necesario utilizar medios técnicos especiales para resolver el problema.
Los más simples son conjuntos de reactivos químicos, cuyos requisitos generalmente aceptados son la ausencia de operaciones que requieran equipos especiales de laboratorio: calentamiento, filtración, extracción con separación precisa de capas líquidas, centrifugación, etc.
Normalmente, las pruebas consisten en reactivos preparados previamente que conservan sus propiedades durante mucho tiempo y en una amplia gama de condiciones climáticas.
Estas pruebas pueden ser realizadas por personas sin formación química especial. y equipo de protección especial (ropa protectora, gafas, guantes, etc.).
Sin embargo, debe tenerse en cuenta que los resultados obtenidos por el método considerado tienen una importancia preliminar. dada la selectividad insuficiente de las reacciones de color.
Esto se explica por la gran cantidad de compuestos existentes y la diversidad de su estructura, teniendo la mayoría de los compuestos orgánicos varios homólogos, y cuando cualquier grupo puede identificarse mediante una reacción adecuada, entonces la misma reacción puede darse mediante homólogos que forman productos de reacción similares.
A pesar de estas limitaciones, la importancia práctica del análisis de gotas para la detección de compuestos narcóticos es muy grande, ya que con un bajo consumo de materiales y tiempo permite elegir la dirección correcta para futuras investigaciones y se adapta fácilmente a las condiciones cambiantes, por ejemplo. por ejemplo, a la aparición de nuevos fármacos o a nuevas formas de envasarlos y camuflarlos. La sensibilidad de los métodos de análisis químico es de 10-5 – 10-7 gramos de la sustancia.
Debido a la selectividad limitada de casi cada uno de los reactivos utilizados, en las pruebas de drogas se deben utilizar varios reactivos, preferiblemente de acuerdo con un esquema específico y estrictamente definido.
Todos los esquemas de detección de drogas conocidos actualmente implican pruebas de uso secuencial y su violación casi siempre conducirá a errores de identificación.
Además, este enfoque reduce la cantidad de reacciones que deben llevarse a cabo para obtener un resultado.
Para diferentes sustancias varía de 2 a 5.
También es importante el resultado económico de la reducción del consumo de reactivos.
Los fabricantes nacionales y extranjeros distribuyen tres tipos principales de pruebas químicas:goteo, ampolla y aerosol. que se basan en reacciones con ácidos inorgánicos concentrados en presencia de iones metálicos del grupo de transición, reacciones de condensación con aldehídos, reacciones de complejación con varios colorantes en un ambiente heterogéneo, así como reacciones de fármacos con reactivos mixtos de los grupos anteriores.
Kits de goteo — están diseñados para análisis en placas de porcelana o vidrio con huecos (placas) donde se colocan muestras de objetos, que luego se tratan con reactivos mediante pipetas o goteros.
El conjunto de gotas más famoso -tipo de reactivos es el conjunto, descrito en la guía para laboratorios nacionales desarrollada por el programa de tráfico de drogas de la ONU.
Otro conocido conjunto de pruebas de gota es el kit de Folin-Vogel (Austria) con un conjunto de reactivos de Merck (Alemania).
La característica de este kit es una combinación de análisis de gotas con tiras especiales impregnadas con reactivos coloreados.
En algunas pruebas de gotas, se utilizan tiras de filtro o papel o tela cromatográfica en lugar de placas.
NarcoTech, Inc. (EE.UU.) produce varios kits de este tipo, diseñados para el análisis de drogas individuales, por ejemplo, cocaína, opiáceos, metanfetamina, drogas como el “éxtasis” y muchas otras, así como un juego completo de reactivos.
Todos los reactivos están envasados en cantidades suficientes para realizar, según el tipo de fármaco, de 120 a 600 pruebas con un número total de pruebas de más de 2800. El coste de un juego completo de este tipo es de menos de 80 dólares, es decir, 3 céntimos. por prueba.
Este tipo de kits de reactivos son los más sencillos y económicos de fabricar. Las pruebas para algunos tipos de drogas se pueden utilizar de forma camuflada, proporcionando una inspección encubierta.
Sin embargo, el uso de este tipo de kits requiere que la persona que realiza la investigación tenga una alta cualificación química tanto a la hora de realizar la prueba en sí, debido a que la mayoría de ellos están compuestos por reactivos extremadamente activos, por ejemplo, ácidos concentrados, como a la hora de interpretar. los resultados obtenidos.
Kits de aerosol — están destinados al análisis en papel de filtro o cromatográfico, sobre el cual se colocan los objetos de prueba y luego se rocían con reactivos coloreados de latas de aerosol.
Las pruebas de tipo aerosol más conocidas son las pruebas de heroína, cocaína, barbitúricos y cannabinoides (HERO, COCA, BARBY y CANNABISPRAY), producidas por una de las empresas israelíes.
Estas pruebas tienen una alta sensibilidad y son bastante fáciles de usar. Sin embargo, como lo han demostrado las repetidas pruebas realizadas por empleados del ECC del Ministerio del Interior de Rusia, estas pruebas arrojan un gran número de falsos positivos, lo que reduce significativamente su valor práctico.
Además, cuando se utilizan pruebas, se forman aerosoles estables de reactivos tóxicos y agresivos, que afectan negativamente la salud de las personas presentes durante las pruebas. Actualmente, las pruebas de aerosol prácticamente no se utilizan en la práctica policial rusa.
Pruebas en ampolla — están destinados al análisis mediante trituración mecánica de ampollas de vidrio con reactivos en recipientes de reacción transparentes, bolsas o tubos de polímero.
Este es el tipo de kit más común en la práctica, incluido el kit estándar generalmente aceptado «NIK» «Becton-Dickinson» (EE. UU.), así como kits de otros fabricantes, incluidos los rusos.
La Tabla 1 muestra las características comparativas de las pruebas rápidas nacionales para análisis de drogas.
Tabla 1. Características comparativas de las pruebas rápidas nacionales para análisis de drogas.
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Nombre del kit de prueba |
Pruebas de cantidad |
Técnica de |
Objetos |
Tiempo y lugar de producción |
|
“EAN ” |
4 |
Reacciones de las gotas en la placa |
Morfina, codeína, heroína, cannabinoides, barbitúricos |
antes de 1987, p. Kupavna, región de Moscú |
|
“EXPRESS” |
4 |
Reactivos en ampolla triturados en un recipiente de polímero transparente |
Igual |
1988 – 1990, Jarkov |
|
“POLYTEST” |
11 |
Igual |
Morfina, heroína, codeína, promedol, barbitúricos, anfetaminas, cocaína, efedrina, lisergida, cannabinoides, opio, paja de amapola |
1991 – 1995, Cherkasy |
|
“SIGMA” |
11 |
Igual, establecido en mayúsculas y minúsculas |
Igual |
1994 – 1996 gg, San Petersburgo |
|
“PRUEBA DE DROGAS” |
11 |
POLYTEST” mejorado con bolsas de polímero |
Igual |
1996 – 1998, Tula |
|
“SIGMA-M” |
14 |
cm . “SIGMA” |
Lo mismo + fenciclidina, metadona, metacualona, amizil, benzodiacepinas |
1996 – 1997, San Petersburgo |
|
“PRUEBA DE DROGAS-2” |
11 |
Reactivos en ampolla triturables en recipiente transparente |
Lo mismo + base de cocaína y crack, difenhidramina, tramal, mescalina, buprenorfina, hierba efedra, materiales vegetales, fenciclidina impregnada o cocaína. |
desde 1998, |
|
“FLOR DE DROGA” |
11 |
Tubos de vidrio con reactivos. Codificación de colores. |
Igual |
desde 2000, |
|
“Narcospectrum” |
11 |
Reactivos y método de codificación mejorados. |
Lo mismo |
desde 2001, |
Actualmente, uno de los kits más avanzados para la detección de estupefacientes y sustancias psicotrópicas es el kit “DRUG COLOR”, el cual está diseñado para el análisis de objetos sólidos, líquidos, material vegetal.
La diferencia fundamental entre el kit y sus conocidos análogos nacionales y extranjeros es que es el primero en implementar un esquema para la codificación digital de la coloración resultante del procesamiento del objeto en estudio y un reactivo químico.
Este esquema fue posible implementar después de su creación una amplia gama de reactivos químicos modificados con mayor selectividad y sensibilidad.
Como resultado, fue posible eliminar significativamente los errores asociados con violaciones en la secuencia de prueba inherentes a los kits de otros fabricantes.
Además, este esquema le permite automatizar de manera muy simple el proceso de lectura de los resultados.
Actualmente, según la información que tenemos, los desarrolladores del kit están trabajando para crear un contador automático de los resultados de las pruebas.
El esquema general para realizar una investigación utilizando el método de análisis químico de gotas se muestra en la Figura 1. En este diagrama, cada columna representa el color de la mezcla de reacción cuando el reactivo (cuyo número se indica en la columna más a la izquierda) se expone a un fármaco específico.
Figura 1. Esquema de investigación con el kit «NARCOSPECTR» p>
El kit “NARCOSPECTR” le permite realizar investigaciones sobre las llamadas drogas derramadas, por ejemplo, en el suelo, en la ropa, etc.
Este kit resultó ser el único capaz de identificar correctamente objetos como la cocaína “marrón” — una droga que ha aparecido recientemente en el tráfico ilícito, tratada especialmente para que sea difícil de detectar mediante pruebas químicas, o la fenciclidina en el tabaco, la marihuana o la hierba de perejil.
La sensibilidad del kit es suficiente incluso para detectar residuos de soluciones inyectables de buprenorfina en las paredes de las ampollas.
Las pruebas incluidas en el conjunto principal de “NARCOSPECTER” están organizadas de la siguiente manera:
- 1-4 pruebas son universales y permiten juzgar la sustancia química. propiedades de las sustancias y, en parte, su estructura. La presencia de estas pruebas es necesaria al realizar un cribado.
- 5-7 pruebas específicas, que permiten juzgar las propiedades específicas de las sustancias o si pertenecen a un grupo específico de sustancias.
La selectividad de los reactivos químicos se probó en más de 280 fármacos y tabletas. El resultado mostró un buen rendimiento del kit para la detección de estupefacientes.
Al mismo tiempo, se observa un número mínimo de resultados falsos positivos, principalmente — para cocaína, crack, grupo fenilalquilamina, ciclodol, aprofeno.
La Tabla 2 muestra los parámetros estadísticos sobre la posibilidad de obtener resultados falsos positivos para una serie de drogas.
El número de resultados falsos positivos para sustancias individuales no fue más del 3,2%.
Tabla 2. Resultados falsos positivos al realizar pruebas con el &# 171;NARKOSPECTRA» falsos positivos
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Nombre |
cantidad |
porcentaje |
|
Heroína |
— |
— |
|
Morfina |
— |
— |
|
Promedol |
— |
— |
|
Barbitúricos |
1 |
0.4 |
|
Dionin |
1 |
0.4 |
|
Codeína |
1 |
0,4 |
|
LSD |
1 |
0.4 |
|
Mescalina |
1 |
0.4 |
|
Tramal |
1 |
0.4 |
|
Fenciclidina |
1 |
0,4 |
|
Difenhidramina |
2 |
0,7 |
|
Metacualona |
2 |
0.7 |
|
Efedrina |
2 |
0,7 |
|
Metadona |
3 |
1,1 |
|
Anfetaminas |
4 |
1.4 |
|
Aprofen |
5 |
1,8 |
|
Buprenorfina |
5 |
1.8 |
|
Ciclodol |
5 |
1,8 |
|
Grieta |
6 |
2.1 |
|
Cocaína |
9 |
3.2 |
El set completo consta de 11 tubos llenos de reactivos que permiten la detección de más de 20 Drogas y sustancias psicotrópicas. El coste de dicho kit no supera los 20 dólares estadounidenses.
Sin embargo, el cliente puede reducirlo significativamente equipando el kit con los reactivos directamente necesarios para resolver sus problemas.
Por lo tanto, los desarrollos nacionales en el campo de los kits para el análisis rápido de drogas mediante métodos químicos tienen altos indicadores tácticos y técnicos en términos de selectividad, variedad de sustancias probadas, facilidad de uso y dimensiones.
Están totalmente adaptados a las condiciones rusas.
En un futuro próximo deberíamos esperar la aparición de nuevos dispositivos, incluidos los automatizados, implementados según los principios discutido anteriormente.
Actualmente, se encuentran disponibles para la venta pruebas rápidas de numerosos fabricantes, incluidos los nacionales, para determinar trazas de drogas en la orina humana — cocaína, anfetamina, metanfetamina, metabolitos de tetrahidrocannabinol, morfina, heroína, que se basan en análisis inmunocromatográficos.
Análisis inmunocromatográfico (ICA) — es un método para determinar bajas concentraciones de sustancias en materiales biológicos. Dichos materiales incluyen sangre completa, suero o plasma, saliva, orina y heces.
ICA — Es un método de análisis relativamente joven y a menudo se lo denomina en la literatura método de inmunoquímica seca, prueba en tira, casete QuikStrip, tira reactiva QuikStrip, prueba rápida o análisis rápido.
Estos nombres están asociados a la velocidad de este método de análisis. Usaremos el nombre ICA (pruebas rápidas inmunocromatográficas (ICA)), ya que indican con mayor precisión el principio del método y su lugar entre otros métodos de análisis. Todos los métodos de análisis inmunológico se basan en la reacción «antígeno— anticuerpo».
Antígeno— se trata de una sustancia que nuestro cuerpo reconoce como extraña y que puede desencadenar una reacción inmunitaria (protectora).
Anticuerpos— Se trata de proteínas que son formadas por las células de nuestro organismo en respuesta a la introducción de un antígeno en el mismo. La propiedad más importante de los anticuerpos es su capacidad para unirse específicamente a un antígeno.
Esto significa que cada anticuerpo (Ab) reconoce y se une solo a un antígeno específico (Ag).
Todos los métodos de análisis inmunológico, incluido el ICA, se basan en esta característica única de los anticuerpos.
1. Resultado positivo: aparición de dos franjas oscuras en la zona de prueba (T) y la zona de control (K).
2. Resultado negativo: aparición de una sola franja oscura en la zona de control.
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|
— antígeno de prueba; |
 |
— conjugado de un anticuerpo específico del antígeno en estudio con un tinte que migra a lo largo de la tira junto con el líquido fisiológico; |
 |
— un anticuerpo específico del antígeno de prueba inmovilizado en una tira reactiva; |
 |
— Anticuerpo secundario específico para anticuerpos colorantes inmovilizados en la tira reactiva. |
Figura 2. Diagrama esquemático del método ICA.
Las pruebas B ICA utilizan tres tipos de anticuerpos: 1) anticuerpos monoclonales solubles contra el antígeno de prueba, conjugados («entrecruzados») con oro coloidal — un tinte que puede identificarse fácilmente incluso en las concentraciones más pequeñas.
Estos anticuerpos se aplican cerca del lugar donde se sumerge la tira reactiva en líquido fisiológico (orina, sangre); 2) anticuerpos policlonales contra el antígeno de prueba, rígidamente inmovilizados en la zona de prueba de la tira; 3) anticuerpos secundarios contra anticuerpos monoclonales, rígidamente inmovilizados en la zona de control de la tira reactiva.
Cuando la prueba se sumerge en líquido fisiológico, comienza a migrar a lo largo de la tira según las principio de cromatografía en capa fina (de ahí el nombre &# 8212; Los anticuerpos y el tinte se mueven junto con el líquido.
Si el antígeno de prueba está presente en este líquido, se une tanto al primer como al segundo tipo de anticuerpos.
En este caso, los anticuerpos con colorante se acumulan alrededor de los anticuerpos rígidamente inmovilizados en el líquido. prueba: zona de la tira ICA, que aparece como una franja oscura brillante. Los anticuerpos que no se han unido al tinte migran más a lo largo de la tira e inevitablemente interactúan con anticuerpos secundarios en la zona de control, donde se observa la segunda franja oscura.
La interacción (y la banda oscura) en la zona de control siempre debe aparecer (si el análisis se realiza correctamente), independientemente de la presencia del antígeno de prueba en el líquido fisiológico.
Con base en lo anterior, existen las siguientes opciones para los resultados de la prueba:
1) dos franjas — resultado positivo;
2) una línea — resultado negativo; 3) sin rayas— el análisis se realizó incorrectamente.
Las pruebas ICA son extremadamente fáciles de usar y tienen una alta sensibilidad, hasta varios nanogramos por ml de objeto.
Sin embargo, se debe tener en cuenta el hecho de que estas pruebas tienen una baja selectividad y requieren Confirmación obligatoria de resultados positivos mediante otros métodos analíticos. En la práctica, se utilizan en laboratorios de química clínica o forense como medio para seleccionar rápidamente entre un gran número de muestras que requieren un examen más detenido.
En este caso, la interpretación de los resultados obtenidos debe confiarse únicamente a empleados capacitados y altamente calificados.
Por ejemplo, como ha demostrado nuestra investigación, un número significativo de pruebas IR de diferentes fabricantes, incluidos los rusos, dan un resultado positivo al analizar la orina en busca de opiáceos, de personas que recientemente consumieron productos culinarios que contienen semillas de amapola o que tomaron varias tabletas de medicamentos combinados que contienen codeína y que, según la legislación rusa vigente, se pueden distribuir sin receta, es decir, sin receta. libremente y sin control.
Esta circunstancia debe tenerse especialmente en cuenta en relación con la adopción del Código Administrativo de la Federación de Rusia y la introducción de la responsabilidad por el uso de drogas ilegales.
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Por lo tanto, las pruebas ICA están diseñadas para examinar fluidos biológicos en busca de drogas.
En este caso, se debe tener en cuenta lo siguiente:
1) estas pruebas operan sólo bajo condiciones fisiológicas o muy similares, como valor de pH, temperatura, ausencia de agentes oxidantes o reductores fuertes. agentes, una cierta fuerza iónica del medio y otros;
2) pruebas, casi todas las pruebas ICA están diseñadas para detectar en fluidos biológicos no los medicamentos en sí, sino sus metabolitos, productos de descomposición en el cuerpo humano, que se eliminan del cuerpo mucho más lentamente que el principio activo.
Por ejemplo, las pruebas ICA para marihuana están diseñadas para detectar el metabolito tetrahidrocannabinol, que está prácticamente ausente en la propia marihuana, o las pruebas ICA para cocaína están diseñadas para detectar benzoilecgonina, que no está presente en todas las muestras incautadas en tráfico ilícito.
Con la llegada de las pruebas ICA hace varios años al mercado ruso, comenzaron los intentos de utilizarlas como herramientas de diagnóstico para el análisis rápido de diversos objetos con el objetivo de clasificarlos como estupefacientes o sustancias psicotrópicas.
Al mismo tiempo, no se tienen en cuenta los detalles de las pruebas en sí, ver arriba, ni los detalles de los objetos en estudio, que pueden contener y contienen componentes activos, por ejemplo, álcali («crack») cuenta.
Además, el uso de estas pruebas en la forma propuesta por el fabricante requirió un procedimiento extremadamente laborioso en condiciones fuera del laboratorio para diluir los objetos probados a concentraciones de prueba de trabajo de aproximadamente 1: 1000 o más.
Como resultado de las pruebas realizadas hace varios años, las organizaciones básicas para verificar las pruebas, incluido el Centro Forense del Ministerio del Interior de Rusia, producidas por una empresa rusa
Progressive Bio-Medical Technologies Ltd. (Moscú) y presentados para su aprobación al Comité Permanente de Control de Medicamentos, estos productos han sido reconocidos como inadecuado para la determinación de sustancias narcóticas en objetos no biológicos debido a su baja eficacia.
Así, el uso de las pruebas ICA para probar estupefacientes y sustancias psicotrópicas en fluidos biológicos, en diversas superficies y, además, para probar diversos objetos con el fin de clasificarlos como drogas, requiere actualmente un cuidadoso estudio metodológico preliminar, sin el cual los resultados obtenidos con Con su ayuda, los resultados no pueden considerarse objetivos y los costos de compra de dichos productos no están justificados.
Literatura
1. Gaevsky A.V., Degtyarev E.V., Simonov E.A. y otros. Examen analítico de sustancias sujetas a control especial en la Federación de Rusia //En colección. resúmenes de informes de la Segunda Conferencia Panrusa sobre Historia y Metodología de la Química Analítica (IMAC-2), 26-29 de enero de 1999, Moscú.
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3. Gaevsky A.V., Simonov E.A. V.I. Examen analítico de sustancias peligrosas //En colección. resúmenes de la Conferencia Panrusa “Análisis químico de sustancias y materiales”, 16-21 de abril de 2000, Moscú.
4. Gaevsky A.V., Degtyarev E.V., Simonov E.A. y otros. Metodología y aspectos legales del análisis químico de sustancias peligrosas //Laboratorio de Fábrica. Diagnóstico de materiales.- T. 66, No. 6.- 2000.- P. 56-63.
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6. Gaevsky A.V., Simonov E.A., Makarov V.G. Selectividad de las pruebas de drogas nacionales y formas de aumentarla //En colección. resúmenes del Simposio de toda Rusia “Métodos de prueba de análisis químico”, 28-30 de noviembre de 2001, Moscú.