Что такое сортировщик клеток?

Что такое сортировщик клеток?

Сортировщик клеток — это устройство, используемое для изоляции определенных клеток. В последние годы анализ отдельных клеток, при котором биологические явления наблюдаются на уровне отдельной клетки, становится все более важным в биологических исследованиях.

Проточная цитометрия является репрезентативной технологией для высокопроизводительного анализа отдельных клеток, а сортировщик клеток используется для разделения и сбора клеток. Сортировщик клеток, как и проточный цитометр, позволяет клеткам, помеченным определенным маркером, течь через трубку. Только определенная популяция клеток может быть асептически отсортирована в отдельную трубку. Затем разделенные и собранные клетки можно культивировать для дальнейшего анализа.

Применение сортировщиков клеток

Сортировщики клеток используются в различных областях, включая исследования рака, генетику, иммунологию и культуральную инженерию. В последнее время эта технология также применяется в медицинской сфере. Например, предпринимаются попытки использовать сортировщики клеток для извлечения только гемопоэтических стволовых клеток и их трансплантации пациентам с лейкемией.

В области регенеративной медицины разрабатываются планы по индукции дифференциации необходимых клеток in vitro из плюрипотентных стволовых клеток, таких как ES-клетки и iPS-клетки, и их использованию для трансплантационной терапии и разработки лекарств. В этом случае также важно собирать только целевые клетки, и технология сортировщиков клеток используется для изоляции и сбора определенных клеток.

Принцип работы сортировщиков клеток

Первый шаг в процессе сортировки клеток — пропускание клеточной суспензии через очень тонкую трубку и разделение клеток по одной. На этом этапе клетки спроектированы так, чтобы течь сверху вниз, и клетки падают в виде капель с кончика сопла. Затем падающие клетки облучаются лазерным светом, и рассеянный от них свет анализируется для считывания характеристик каждой клетки. Прибор мгновенно определяет, следует ли разделять клетки или нет. Когда обнаруживается клетка, подлежащая разделению, капле, содержащей эту клетку, присваивается заряд + или -. Затем заряженная капля падает между двумя последовательными поляризаторами. Капли с зарядом + притягиваются к отрицательной пластине, а капли с зарядом — притягиваются к положительной пластине и собираются в пробирках, расположенных под каждой пластиной. Незаряженные капли падают вертикально и обычно отбрасываются. Некоторые приборы используют микропланшеты в качестве сосудов для сбора, и клетки можно аликвотировать в каждую лунку планшета.