Что такое препаративная ВЭЖХ?

Что такое препаративная ВЭЖХ?

Препаративная ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) — это метод, который разделяет и собирает компоненты из смеси. Он широко используется для очистки основных компонентов или сбора следовых количеств примесей, содержащихся в образцах. Используя те же принципы, что и стандартный анализ ВЭЖХ, препаративная ВЭЖХ достигает разделения и очистки на основе характеристик соединения, таких как химическая структура, молекулярная масса и стерическая структура. Этот процесс можно масштабировать от миллиграммов до килограммов, регулируя размер колонки и конфигурацию прибора.

Применение препаративной ВЭЖХ

Препаративная ВЭЖХ необходима в различных областях:

1. Очистка химического синтеза

Используется для разделения и получения отдельных компонентов после химического синтеза, особенно в органической и биохимической областях, где образцы часто содержат примеси и побочные продукты.

2. Анализ побочных реакций

Позволяет собирать отдельные фракции для анализа основных компонентов и примесей, что необходимо в промышленности материалов и химической промышленности для оценки чистоты образца и анализа побочных реакций.

3. Очистка белков и макромолекул

Используется в биологических областях для очистки белков и макромолекул с использованием колонок для гель-хроматографии для точного фракционирования.

4. Очистка натуральных продуктов

Используется для извлечения определенных соединений из сложных образцов натуральных продуктов, часто с использованием колонок с обращенной фазой для разделения с высоким разрешением.

Принцип препаративной ВЭЖХ

Препаративная ВЭЖХ работает аналогично аналитической ВЭЖХ, разделяя соединения на основе их взаимодействия с неподвижной фазой в колонке. Колонки, заполненные пористым силикагелем или силикагелем с модифицированными функциональными группами, облегчают разделение компонентов на основе их физико-химических свойств по мере их прохождения через колонку.

Другая информация о препаративной ВЭЖХ

1. Стационарные фазы (нормальная и обращенная фаза)

Функция неподвижной фазы варьируется в зависимости от ее состава. Режим нормальной фазы использует силикагель с органическими растворителями, в то время как режим обращенной фазы, обычно использующий модифицированный C18 силикагель, разделяет вещества на основе их гидрофильной или липофильной природы.

2. Интеграция коллектора фракций

Препаративная ВЭЖХ может быть сопряжена с коллектором фракций для разделения и сбора элюатов в определенное время, что позволяет концентрировать и очищать целевые продукты.

3. Система рециркуляции

Система рециркуляции препаративной ВЭЖХ использует переключающий клапан для многократного пропускания элюатов через колонку, что повышает эффективность разделения. Эта установка имитирует эффект более длинной колонки, обеспечивая лучшее разрешение, но требуя специального устройства.