Что такое микроспектрофотометр?

Что такое микроспектрофотометр?

Микроспектрофотометр — это спектрофотометр, специализированный для измерения очень малых количеств образцов.

Как и спектрофотометр, он предназначен для количественного анализа с целью определения концентрации определенных веществ в образце. Он может анализировать количество ДНК, белка и других веществ, содержащихся в образце, и широко используется в области естественных наук.

Сами приборы компактны и просты в обращении, а также доступны модели с сенсорными панелями и модели, которые могут легко выводить данные наружу.

Применение микроспектрофотометров

Основное применение микроспектрофотометров — определение ДНК, РНК, олигонуклеиновых кислот и белков из чрезвычайно малых количеств образцов. Они в основном используются в исследованиях и разработках в области естественных наук.

Количественная оценка и оценка чистоты нуклеиновых кислот и белков — необходимый процесс при подготовке геномной ДНК, ОТ-ПЦР и контроле качества образцов. Кинетическая оценка также выполняется путем мониторинга роста бактериальной культуры и измерения с течением времени.

Принципы работы микроспектрофотометров

Основной принцип работы микроспектрофотометра такой же, как и у спектрофотометра. Спектрофотометр определяет концентрацию определенного вещества в образце на основе того, сколько света, падающего на образец, проходит через него. Чем выше концентрация, тем ниже пропускание, поскольку свет блокируется веществами, растворенными в образце.

Структура микроспектрофотометров

Спектрофотометр — это прибор, состоящий из источника света, ячейки для образца (например, порта образца в случае микроспектрофотометра) и детектора. Свет, испускаемый источником света, разделяется на монохроматический свет с помощью монохроматора, излучается на образец, а свет, проходящий через образец (прошедший свет), измеряется с помощью детектора.

Калибровочная кривая количества прошедшего света (поглощения) и концентрации готовится с использованием раствора известной концентрации для определения концентрации неизвестного образца.

Типы микроспектрофотометров

Микроспектрофотометры, как правило, способны измерять очень малые объемы образцов, но минимальный объем варьируется от прибора к прибору. Например, есть 0,3 мкл, 0,5 мкл, 1 мкл и т. д. Важно выбрать подходящий для используемого образца.

С другой стороны, некоторые приборы можно использовать в ячейке или на кюветной доске для измерения образцов определенного объема. Некоторые микроспектрофотометры также оснащены алгоритмами и программами, помогающими выполнять расширенные анализы.

Например, те, которые оснащены программами, позволяющими проводить измерения с течением времени на определенных длинах волн, полезны для выполнения кинетического анализа. Другие оснащены справочной библиотекой спектров и алгоритмами прогнозирования примесей, которые могут прогнозировать примеси в образце и вычислять более точные концентрации образца.

Другая информация о микроспектрофотометрах

1. Обработка образцов для микроспектрофотометра

В обычном спектрофотометре образец помещается в ячейку для измерения. Однако в микроспектрофотометре образец настолько мал, что его обычно опускают в порт для образца с помощью пипетки для измерения. Некоторые приборы можно использовать для измерений, отличных от микроколичеств, и можно анализировать образцы, помещая их в ячейку, как в обычном микроспектрофотометре, или используя кюветную доску.

В микроспектрофотометрах часто важно, чтобы капли образовывались за счет поверхностного натяжения, поэтому каждый продукт имеет свой механизм для обеспечения правильного измерения. Некоторые приборы также предназначены для ограничения образца в герметичном пространстве, чтобы снизить риск испарения или загрязнения.

2. Источник света

В качестве источника света часто используются ксеноновые импульсные лампы. Ксеноновые импульсные лампы характеризуются высокой яркостью и низким тепловыделением от ламп. Это снижает повреждение образцов, чувствительных к изменениям температуры.