Что такое анализ отдельных клеток?
Недавние достижения в технологии анализа генома показали, что даже кажущиеся однородными популяции клеток на самом деле являются неоднородными, когда отдельные клетки изолированы и проанализированы. Анализ отдельных клеток дает представление об уникальных характеристиках отдельных клеток, что приводит к значительным применениям в таких областях, как исследования рака, иммунология и открытие лекарств. Этот подход позволяет исследовать клеточные реакции на индивидуальном уровне, выходя за рамки средних значений, полученных с помощью традиционного генетического анализа на основе популяций.
Метод разделения клеток для анализа отдельных клеток
Отдельные клетки можно разделить вручную, но этот метод имеет низкую производительность. Для высокопроизводительной обработки микрофлюидика используется для захвата клеток в камерах, которые могут вместить только одну клетку. Однако количество клеток, которые могут быть захвачены, ограничено площадью пластины, используемой для создания ловушки, обычно охватывающей несколько сотен клеток. Для обработки большего количества клеток в последнее время стандартом стали системы разделения клеток на основе капель.
В системах на основе капель в качестве непрерывной фазы используется фторированное масло, а в качестве дисперсной фазы — гидрогель или лизирующий буфер. Такая установка позволяет инкапсулировать одну клетку в каждой капле, создавая тысячи капель в секунду. Инкапсуляция гидрогелем особенно полезна для 3D-культуры, исследований клеточного ответа и FACS, в то время как инкапсуляция со специализированными шариками штрихкода используется для захвата мРНК и анализа экспрессии генов.
Принцип разделения отдельных клеток на основе капель
Метод разделения отдельных клеток на основе капель подразумевает создание капель в точке соединения в микрожидкостном канале. Это достигается путем перекачивания клеточной суспензии, клеточного лизата и фторированного масла. Клеточная суспензия и лизат смешиваются непосредственно перед инкапсуляцией, что гарантирует лизирование клеток внутри капли. Этот метод обеспечивает точную и эффективную инкапсуляцию отдельных клеток, облегчая подробный клеточный анализ.
